γ干扰素释放试验分析技术(IGRA)概述

γ干扰素释放试验分析技术(interferon gamma release assay，IGRA)是一种用于结核杆菌感染的体外免疫检测的新方法。利用结核分枝杆菌而非牛分枝杆菌BCG株系表达的抗原刺激外周血单核产生IFN-γ，2011年以前，全球只有澳大利亚和英国两种γ干扰素释放试验（IGRA）试剂盒被批准用于临床检测，2011年7月，国内首款由海口VTI生物研究院研发生产的IGRA试剂盒(A.TB)正式获国家食品药品监督管理局批准。

一、IGRA原理

机体感染结核杆菌以后，体内存在特异的效应T细胞，并存在于患者的外周静脉血中，当这些特异效应T细胞再次受到结核分枝杆菌特异抗原刺激时会分泌细胞因子γ-干扰素（Interferon γ，IFN-γ）。通过对该细胞因子的定量检测，可以对疾病的感染状况进行判断，判断机体被结核杆菌感染的风险。

根据这个原理，选取存在于结核杆菌，但在卡介苗和大多数非结核杆菌中普遍缺失的RD1区编码的ESAT-6和CFP-10作为结核杆菌特异性抗原，与新鲜采取的全血或者PBMC(外周血单个核细胞)充分混合孵育后，应用酶联免疫法或者免疫斑点法检测特异性γ-干扰素的释放。

   由于效应T细胞存活时间很短（6周左右），而且具有特异性，因此可以作为机体是否正处于被感染或近期感染的指标，无论是否有临床症状。

二、IGRA技术优势

1、特异性高

   IGRA所用刺激抗原为结核分枝杆菌特有抗原，而非结核分枝杆菌提取物，特异性高，不受卡介苗接种和非结核分枝杆菌的干扰，同时也不受导致类结核病症状的其他致病菌的影响。可以大大减少潜伏性结核假阳性患者的医疗花费。

2、灵敏度好

不仅对细菌学检查阳性结核病患者检出率较高，对菌阴及其他结核病患者也有90%以上的检出率，而菌阴及其他结核病患者恰恰是目前临床诊断的难点；在免疫力低下/受抑制人群中也有很高的检出率，不受免疫力影响，肺内结核和肺外结核均有较高的检出率。

3、安全快速

   非人体试验，不需随访，结果判定客观，且不会对机体免疫状态产生影响。24小时即可报告结果，患者无须返回获取检测结果，并且实验室质量控制几乎可确保每次均可获得有意义的结果，在大型结核控制项目的背景之下IGRA具有较好的成本效益。

   因为具有高敏感性和高特异性，并且不受卡介苗和大多数非致病分枝杆菌的影响，IGRA在结核诊断中的意义正在被越来越多的临床实验所证实，尤其对于像中国这样普遍接种卡介苗的结核高负担国家，更具有重要意义。

三、IGRA应用现状

   IGRA技术是国际最新的用于结核杆菌感染的体外免疫诊断方法，在北美、欧洲和日本已被广泛应用于结核杆菌感染的检测，包括结核病辅助诊断、高危人群筛查、公共卫生突发事件、体检等(含不孕不育人群)。

美国CDC指南建议，在当前应用TST的所有情况下均可采用IGRA替代，多个大型公共卫生机构已将TST全部替换为IGRA，美国和日本已经将该技术写入该国用于结核防治的指导原则中。