ELISPOT检测中运用两种抗原PK混合抗原，谁更胜一筹？

γ-干扰素释放试验（IGRA）是近年来潜伏结核感染和结核病诊断中应用越来越广泛的技术。其主要原理是受到结核分枝杆菌抗原刺激而致敏的T细胞再次遇到同类抗原时可产生γ-干扰素，通过检测γ-干扰素的含量或分泌γ-干扰素的T细胞的数量来判断机体是否感染结核分枝杆菌。

基于IGRA原理的方法中，又以酶联免疫斑点法（ELISPOT）占国内主导地位。它结合了细胞培养技术与ELISA技术，并选用致病性结核分枝杆菌特有的早期分泌性抗原靶蛋白6（ESAT-6）和培养滤过蛋白10（CFP10）两种抗原进行特异性刺激，能够在单细胞水平定量检测分泌γ-干扰素的T细胞的数量，大大提高了反应的敏感度和特异度。

ELISPOT检测中所使用的抗原ESAT-6和CFP10虽然都是致病结核分枝杆菌特有的两种抗原，且具有相同的菌种分布，但二者之间也存在一定的差异。有研究指出，ESAT-6存在于结核分枝杆菌的培养物滤液和细胞质、细胞壁中，而CFP10主要在培养滤过液、细胞质和膜碎片中存在，二者对细胞的刺激机制可能不完全相同。另外，这两种蛋白都属于低分子量的分泌蛋白，具有很强的细胞免疫活性，融合后可能会因为蛋白分子量的增加致使细胞免疫活性下降。也可能由于这种融合蛋白中ESAT-6和CFP10的空间结构相互影响，致使其特定的抗原决定簇被屏蔽[，从而导致蛋白活性受到影响。而将抗原ESAT-6和CFP10分开进行检测，能够有效地避免这一现象导致的蛋白活性降低的问题。

从检测对象来说，不同个体的T细胞系对重组的ESAT-6和CFP10的免疫反应各异。因此，选取这两种特异性蛋白分别刺激患者，有助于研究不同蛋白对不同结核病患者产生的不同免疫反应。

综上所述，ESAT-6和CFP10在ELISPOT检测中分开，分别刺激检测具有多种操作优势：

1、检测敏感度和特异度有较大程度提高；

2、抗原决定簇暴露更彻底，具有更强细胞免疫活性；

3、大幅度提高临床诊断的准确性。　

博赛生物TB-SPOT试剂研发基于以上原理，并且与进口T-SPOT·TB试剂相比，从研发、操作、结果判定、临床诊断上均具有较高的一致性，具有良好的检测效能。

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     两种抗原分开检测！